PCR實(shí)驗室建(jiàn)設(shè)基(jī)本屬於(yú)特種實驗室(shì)建(jiàn)設(shè)中的(dí)一種(zhǒng)，例如(rú)現在我國新冠病(bìng)毒(dú)疫情(qíng)頻發，就(jiù)需要(yào)各地市醫療(liáo)機(jī)構進一(yī)步加強(qiáng)PCR實(shí)驗(yàn)室(shì)建設，擴展(zhǎn)病(bìng)原微生物(wù)的(dí)檢(jiǎn)驗項(xiàng)目，提高(gāo)當(dāng)地(dì)衛生應急(jí)檢(jiǎn)測(cè)能力，為(wéi)人(rén)民群眾的(dí)身(shēn)體健康保駕護(hù)航，為政(zhèng)績為民生做出(chū)更好的貢獻(xiàn)。是一項(xiàng)在(zài)時間(jiān)內體(tǐ)外大量擴增特(tè)定的DNA片段(duàn)的(dí)分(fēn)子生(shēng)物學技術。PCR實驗(yàn)室或稱(chēng)PCR擴增(zēng)實驗室,就是進行(háng)聚合(hé)酶鏈反應的(dí)實(shí)驗(yàn)場(cháng)所。
     PCR實驗(yàn)室的(dí)設(shè)計

　　PCR實驗(yàn)室(shì)的空(kōng)間設(shè)計有其固定的模式(shì),PCR實驗(yàn)室麵積及(jí)實(shí)驗用(yòng)房的(dí)要求基本一(yī)致,與(yǔ)醫(yī)院本身或檢(jiǎn)測(cè)機(jī)構的規(guī)模(mó)，日門(mén)診量(liáng)等(děng)關係不大(dà)。

　　PCR是由四(sì)間(jiān)相鄰的實(shí)驗(yàn)室組成,包(bāo)括試(shì)劑(jì)準備(bèi)區(qū)(產(chǎn)品準備區)標本製(zhì)備區(qū)，擴(kuò)增區(qū)和產物分析(xī)區,通(tōng)常(cháng)每間(jiān)麵積在(zài)10m2左右。在使用實時熒光PCR儀，HIV病毒載量(liáng)測定(dìng)儀(yí)的PCR實驗時,通常可僅(jǐn)設(shè)立(lì)三間實驗(yàn)室。
       PCR實驗室的(dí)平(píng)麵(miàn)設計有(yǒu)嚴格的(dí)要求,為避(bì)免汙染(rǎn),流綫必須不(bù)可(kě)逆,且隻(zhī)能(néng)是按(àn)試(shì)劑(jì)備區→標本(běn)製(zhì)備(bèi)區→擴(kuò)增區(qū)→產物分(fēn)析區(qū)的(dí)順(shùn)序(xù)單(dān)向(xiàng)序列。PCR實驗室之間必須有單獨的內(nèi)部(bù)走(zǒu)廊,不能使(shǐ)用(yòng)公(gōng)共走(zǒu)廊(láng),各(gè)實(shí)驗室間需要(yào)有傳(chuán)遞(dì)窗進行(háng)標本(běn)無(wú)菌(jūn)傳(chuán)遞,進(jìn)入(rù)四間實驗室(shì)之(zhī)前都必須(xū)要過(guò)緩衝空間。各區(qū)必須(xū)相(xiāng)互(hù)獨立,儀器(qì)設(shè)備和各種物品(pǐn)應嚴格分開,不能混(hùn)用(yòng)。每(měi)間實(shí)驗(yàn)室(shì)內(nèi)須(xū)安裝(zhuāng)紫(zǐ)外綫(xiàn)燈,供(gōng)實(shí)驗(yàn)前後進行空(kōng)氣消(xiāo)毒(dú)。

　　為保證(zhèng)實(shí)驗的(dí)準(zhǔn)確(què)性,試(shì)劑準備區及標本(běn)製備(bèi)區的風壓宜呈微正壓,以防(fáng)外界含(hán)核酸(suān)氣(qì)溶(róng)膠的空氣(qì)進(jìn)入(rù),造(zào)成汙(wū)染(rǎn),通(tōng)過(guò)控(kòng)製進(jìn)風風量大(dà)於排(pái)風風量(liáng)達(dá)到(dào)正(zhèng)壓效果。擴(kuò)增(zēng)室(shì)及產物分析(xī)室應呈(chéng)微負壓,以防含核酸(suān)的氣溶膠擴散汙(wū)染(rǎn)試劑與樣(yàng)品,通過(guò)控製排(pái)風(fēng)風量(liáng)大於進風(fēng)風量(liáng)達到負壓效果(guǒ)。理想情況(kuàng)下(xià)緩衝(chōng)內(nèi),可(kě)設置(zhì)正(zhèng)壓,使(shǐ)室(shì)內空氣(qì)不(bù)流向(xiàng)室(shì)外,室外空氣(qì)不(bù)流向室(shì)內。

PCR實(shí)驗室典(diǎn)型平麵圖

PCR實驗(yàn)室(shì)的(dí)設計與(yǔ)建設技(jì)術要(yào)求

分區	設(shè)計要求(qiú)	壓力	溫(wēn)度(dù)	濕(shī)度	照(zhào)度
PCR走(zǒu)廊(láng)	實(shí)驗(yàn)室分(fēn)割合理(lǐ)，寬敞明亮(liàng)，各區人流方(fāng)向一目(mù)了(liǎo)然	微負壓	20-26°C	40--60%	主實驗(yàn)室300LX,其它房間200-300LX
試劑(jì)準備區(qū)	各(gè)區有(yǒu)獨立(lì)的空氣(qì)對外排放(fàng)裝置(zhì)，中(zhōng)央空調出風口(kǒu)封(fēng)閉(bì)	正(zhèng)壓	20-26°C	40-60%	主(zhǔ)實(shí)驗室300LX,其它房間200-300LX
樣(yàng)品(pǐn)製備(bèi)區	所有分割(gē)連接處(chǔ)作到密封，間隙(xì)不(bù)能超過0.4cm	正(zhèng)壓(yā)	20-26°C	40-60%	主(zhǔ)實驗(yàn)室300LX,其它房間200-300LX
擴增(zēng)區(qū)	人員(yuán)流動(dòng)要(yào)求(qiú)在(zài)地麵標有路標箭頭	-10pa	20-26°C	40-60%	主實(shí)驗室300LX,其(qí)它房(fáng)間200-300LX
擴(kuò)增(zēng)產物分(fēn)析室(shì)	傳遞窗(chuāng)兩麵(miàn)要求(qiú)有門(mén)	-20pa	20-26°C	40-60%	主(zhǔ)實驗(yàn)室300LX,其(qí)它房間(jiān)200-300LX

《臨(lín)床(chuáng)基因擴增(zēng)檢(jiǎn)驗實驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準》中(zhōng)規定了(liǎo)PCR實(shí)驗室(shì)每個區所需(xū)的儀器設(shè)備一(yī)覽表(biǎo)

房間名稱	儀器設備名(míng)稱(chēng)
試(shì)劑(jì)準備區	高速(sù)台式(shì)離心(xīn)機(jī)，超淨台，天(tiān)平，混匀器，冰箱，微量加樣(yàng)器(qì)X2
標本製(zhì)備區	高速台式離心(xīn)機(jī)，超淨(jìng)台，天平(píng)，混匀器，冰箱，水浴(yù)箱(xiāng)或(huò)加(jiā)熱模塊(kuài)X2，生(shēng)物(wù)安全(quán)櫃，移動紫外燈，微量加樣器(qì)X2
擴增區	基因擴(kuò)增儀，移動(dòng)紫外(wài)燈(dēng)，微(wēi)量加(jiā)樣器
產(chǎn)物(wù)分析區	移動紫外(wài)燈，酶標儀，洗扳機(jī)，恒溫(wēn)箱，微(wēi)量(liáng)加(jiā)樣器X2

　  PCR實(shí)驗(yàn)室的裝修(xiū)

　　⊙主(zhǔ)體結(jié)構：主(zhǔ)題為彩銅(tóng)板(bǎn)，鋁(lǚ)合(hé)會(huì)型材。內所有陰(yīn)角，陽(yáng)角均采用銅(tóng)合(hé)金50內圓角鋁，從(cóng)而解決容易汙(wū)染，積塵(chén)，不易清掃等問題。結(jié)構牢(láo)固(gù)，綫(xiàn)條(tiáo)簡(jiǎn)明，美觀大(dà)方(fāng)，密封(fēng)性好。

　　⊙標(biāo)準的(dí)三區(qū)分隔和氣(qì)壓調節：將PCR過程分(fēn)成試劑準(zhǔn)備，標(biāo)本製備和(hé)PCR擴(kuò)增(zēng)檢(jiǎn)測三(sān)個獨(dú)立的實驗(yàn)區(qū)。整(zhěng)個區(qū)域(yù)有(yǒu)一個(gè)整(zhěng)體緩(huǎn)衝(chōng)走廊(láng)。每個獨立實驗區設置有緩衝(chōng)區，同(tóng)時各(gè)區通過氣壓(yā)調(tiáo)節，使(shǐ)整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程(chéng)中試劑和標本(běn)免受(shòu)氣(qì)溶(róng)膠的汙染並降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和(hé)環境(jìng)的(dí)汙(wū)染。可(kě)打開(kāi)緩衝(chōng)區1,緩衝區2和PCR擴(kuò)增(zēng)區的排風扇往(wǎng)外排(pái)氣，在(zài)實(shí)驗(yàn)區的外(wài)牆上和(hé)各扇門上(shàng)都安(ān)裝有(yǒu)風(fēng)量可(kě)調的回風口，空氣(qì)通(tōng)過回風(fēng)口向(xiàng)室內換氣。

　　⊙消(xiāo)毒：在三(sān)個實驗區(qū)和三(sān)個緩(huǎn)衝區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫(zǐ)外燈，供消(xiāo)毒(dú)用。在試列(liè)準備區(qū)和(hé)標本(běn)製備區還設(shè)置移(yí)動紫外(wài)綫燈(dēng)，對實驗(yàn)桌(zhuō)進(jìn)行局部消(xiāo)毒

　　⊙機械(xiè)連(lián)鎖(suǒ)不(bù)鏽(xiù)鋼(gāng)傳遞窗：試劑和(hé)標本通(tōng)過機(jī)械(xiè)連鎖(suǒ)不鏽鋼(不建議(yì)使(shǐ)用電子連鎖方(fāng)式(shì))傳(chuán)遞窗(chuāng)傳遞，保證(zhèng)試劑和(hé)標(biāo)本在傳(chuán)遞過程中(zhōng)不(bù)受(shòu)汙染(rǎn)(人(rén)物分(fēn)流(liú))。

　　⊙地(dì)麵(miàn)：地麵建(jiàn)議使用PVC卷(juàn)材地(dì)麵(miàn)或自流坪地麵，整(zhěng)體性好(hǎo)。便於(yú)進(jìn)行清掃，耐(nài)腐蝕(shí)。沒(méi)有條件的(dí)也(yě)可采(cǎi)用水磨(mó)石地麵，或大塊(kuài)的(dí)瓷(cí)磚(至(zhì)少(shǎo)800mm*800mm)接縫需(xū)要(yào)小於(yú)2mm.

　　⊙照明：燈具要選用(yòng)淨化(huà)燈具(jù)，能達到(dào)便於(yú)清(qīng)洗，不積(jī)塵(chén)的(dí)特(tè)點
 

　  PCR實(shí)驗室建(jiàn)設延申閱(yuè)讀

　　基因擴增(zēng)檢(jiǎn)驗(yàn)實(shí)驗室的規(guī)範(fàn)化(huà)設置(zhì)

　　臨床(chuáng)基因(yīn)擴增(zēng)檢(jiǎn)驗實驗室(shì)的規範化設置詳見(jiàn)《臨床基(jī)因擴(kuò)增檢驗實(shí)驗(yàn)室管(guǎn)理(lǐ)暫(zàn)行辦法》(衛醫發(fā)[2002]10號文)附件《臨(lín)床(chuáng)基因(yīn)擴增(zēng)檢(jiǎn)驗(yàn)實驗室基本設(shè)置(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》。為避免(miǎn)汙(wū)染，必(bì)須嚴格遵(zūn)循(xún)《臨(lín)床(chuáng)基因擴增(zēng)檢驗(yàn)實(shí)驗室(shì)設置(zhì)標(biāo)準》設(shè)置臨床基因(yīn)擴增檢驗(yàn)實驗(yàn)室(shì)。 臨床基(jī)因擴增(zēng)檢(jiǎn)驗(yàn)實驗室四個隔開(kāi)的(dí)工作區(qū)域(yù)中(zhōng)每一(yī)區(qū)域都(dū)須有(yǒu)專用的(dí)儀(yí)器(qì)設備。各區域都必須(xū)有明確(què)的標記(jì)，以避免設備(bèi)物品(pǐn)如(rú)加樣(yàng)器或(huò)試(shì)劑等從(cóng)其各自的(dí)區(qū)域(yù)內移出從而(ér)造(zào)成(chéng)不同的工(gōng)作區域(yù)間設備物品發生(shēng)混(hùn)淆(xiáo)。進(jìn)入(rù)各個工(gōng)作區域必須(xū)嚴格遵循單(dān)一方(fāng)向順(shùn)序，即隻能從(cóng)試(shì)劑(jì)貯(zhù)存和準(zhǔn)備(bèi)區，標(biāo)本(běn)製備區，擴增反應混合物(wù)配製(zhì)和(hé)擴(kuò)增(zēng)區(簡稱(chēng)擴增區(qū))至產物分析區，避(bì)免發生(shēng)交叉(chā)汙染。在不同(tóng)的工(gōng)作區域應使(shǐ)用不(bù)同顏(yán)色或有明顯區別標誌(zhì)的(dí)工作服，以便於(yú)鑒別。此外(wài)，當工作者離(lí)開工(gōng)作區(qū)時，不得將各(gè)區特(tè)定的工(gōng)作服帶出。 清潔(jié)方法不當(dāng)也是(shì)汙染(rǎn)發生(shēng)的一個(gè)主(zhǔ)要(yào)原因，因(yīn)此實驗(yàn)室(shì)的清潔(jié)應(yīng)按(àn)試(shì)劑貯存(cún)和(hé)準備區至擴增產物分析區的(dí)方向進(jìn)行(háng)。不(bù)同(tóng)的實驗(yàn)區域(yù)應(yīng)有其(qí)各自的清(qīng)潔(jié)用具以防止交叉汙(wū)染(rǎn)。

　　(一)試劑貯存和(hé)準(zhǔn)備(bèi)區(qū)

　　下述操作在(zài)該區(qū)進(jìn)行(háng)：貯(zhù)存試劑的(dí)製(zhì)備，試劑(jì)的分裝和主反應(yīng)混(hùn)合液的製備(bèi)。

　　貯存(cún)試劑(jì)和用(yòng)於標(biāo)本(běn)製(zhì)備的(dí)材(cái)料(liào)應(yīng)直接(jiē)運送至(zhì)試劑(jì)貯存(cún)和(hé)準備區(qū)，不能(néng)經過(guò)產物分析區(qū)。在打開含有(yǒu)反應(yīng)混合液的離(lí)心(xīn)管或試管前，應(yīng)將(jiāng)其(qí)快(kuài)速離(lí)心(xīn)數(shù)秒(miǎo)。試劑原(yuán)材料必須貯(zhù)存在本區(qū)內，並(bìng)在本(běn)區內製備成所需的(dí)貯存試劑。當貯(zhù)存試(shì)劑溶液經檢查(chá)可(kě)用後，應將其分裝貯(zhù)存(cún)備(bèi)用(yòng)，避免由於經(jīng)常(cháng)打(dǎ)開(kāi)反應(yīng)管吸液(yè)而造成汙(wū)染。

　　含(hán)反(fǎn)應(yīng)混(hùn)合液的離心管(guǎn)或試(shì)管(guǎn)在冰(bīng)凍前(qián)都(dū)應快(kuài)速離心數秒。大多(duō)數(shù)用於擴增(zēng)的試劑都應冰凍(dòng)貯存。為避(bì)免因(yīn)單次反應(yīng)取液而(ér)頻繁(fán)的凍融主(zhǔ)貯存(cún)試劑，應分(fēn)裝(zhuāng)冰(bīng)凍(dòng)貯存試劑(jì)溶液。貯(zhù)存試劑的分裝(zhuāng)體積(jī)根據(jù)通常在(zài)實(shí)驗室內(nèi)一次測定所需的(dí)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應數(shù)來決定(dìng)。

　　主反(fǎn)應混(hùn)合(hé)液(yè)的(dí)組成成份尤(yóu)其(qí)是聚合酶的適(shì)用性和(hé)穩(wěn)定性通過(guò)預試驗(yàn)來檢(jiǎn)查(chá)，評價(jià)結(jié)果必(bì)須(xū)有書麵(miàn)報(bào)告。對於(yú)"熱(rè)啟(qǐ)動(dòng)"技(jì)術(在第(dì)一(yī)個高溫變(biàn)性步驟(zhòu)後(hòu)加入酶)，聚合(hé)酶(méi)也可(kě)不包含在主反應混(hùn)合(hé)液(yè)中(zhōng)。

　　在(zài)整(zhěng)個本區的實驗操作(zuò)過程(chéng)中(zhōng)，操作者必(bì)須戴(dài)手套，並經常更(gēng)換(huàn)。此外，操作(zuò)中使用(yòng)一次(cì)性帽(mào)子(zǐ)也是一個有效地防止汙(wū)染(rǎn)的措(cuò)施。 嚴禁用嘴吸取液體(tǐ)，加(jiā)樣器和吸頭(tóu)等(děng)必(bì)須經高(gāo)壓處(chǔ)理(lǐ)。

　　工(gōng)作(zuò)結束(shù)後(hòu)必(bì)須立即(jí)對(duì)工作區進(jìn)行(háng)清(qīng)潔。本(běn)工作(zuò)區(qū)的(dí)實(shí)驗台表(biǎo)麵應(yīng)可耐受諸(zhū)如(rú)次氯酸(suān)鈉的(dí)化(huà)學物(wù)質(zhì)的消(xiāo)毒清潔(jié)作用(yòng)。實(shí)驗台表麵的紫(zǐ)外照(zhào)射(shè)應(yīng)方便(biàn)有效(xiào)。由於紫(zǐ)外(wài)照(zhào)射(shè)的距離和(hé)能(néng)量(liáng)對去汙染的效(xiào)果(guǒ)非常(cháng)關鍵(jiàn)，因此可使(shǐ)用可(kě)移動紫外(wài)燈(dēng)(254nm波(bō)長(cháng))，在工作(zuò)完(wán)成(chéng)後調(tiáo)至實(shí)驗台(tái)上60~90cm內照射(shè)。由(yóu)於(yú)擴增(zēng)產物僅(jǐn)幾(jī)百(bǎi)bp，對(duì)紫(zǐ)外綫損(sǔn)傷不(bù)敏(mǐn)感(gǎn)，因(yīn)此紫(zǐ)外(wài)照射擴增(zēng)片段(duàn)必須延長照射(shè)時(shí)間，*好(hǎo)是照(zhào)射(shè)過(guò)夜(yè)。實驗室及其(qí)設備(bèi)的使用必須(xū)有日(rì)常(cháng)記錄(lù)。

　　(二)標(biāo)本製備(bèi)區(qū)

　　下(xià)述操作在(zài)該(gāi)區進(jìn)行(háng)：臨(lín)床(chuáng)標本(běn)的保存，核酸(RNA，DNA)提取(qǔ)，貯存(cún)及(jí)其(qí)加入至擴增反應管(guǎn)和測定(dìng)RNA時cDNA的(dí)合成。 要正(zhèng)確使用加樣(yàng)器(qì)。由(yóu)於在(zài)加樣(yàng)操(cāo)作中可(kě)能會(huì)發生氣溶(róng)膠所致(zhì)的汙(wū)染，所以(yǐ)應避免在本(běn)區(qū)內不必要的(dí)走動(dòng)。可通過(guò)在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正(zhèng)壓條件避免從鄰(lín)近區進(jìn)入(rù)本(běn)區(qū)的(dí)氣(qì)溶(róng)膠(jiāo)汙染。為避免樣(yàng)本(běn)間(jiān)的交(jiāo)叉汙(wū)染，加入待(dài)測核酸(suān)後(hòu)，必須蓋好(hǎo)含反(fǎn)應(yīng)混合(hé)液的(dí)反(fǎn)應管(guǎn)。對具(jù)有潛在傳染危險性的材料，必(bì)須(xū)有明確(què)的(dí)樣本處(chǔ)理和滅(miè)活程(chéng)序。 用過的(dí)加樣器(qì)吸(xī)頭必須放入專(zhuān)門(mén)的消毒(例(lì)如含次氯酸鈉溶液(yè))容器內。實(shí)驗(yàn)室桌(zhuō)椅(yǐ)表麵每次(cì)工(gōng)作(zuò)後都(dū)要(yào)清潔，實(shí)驗材(cái)料(原(yuán)始(shǐ)血標(biāo)本(běn)，血清(qīng)標本，提(tí)取(qǔ)中的標(biāo)本與試劑(jì)的(dí)混(hùn)合(hé)液(yè)等)如出現(xiàn)外濺，則必須分(fēn)別處理(lǐ)並作出(chū)記錄。 對(duì)實驗台適當(dāng)的(dí)紫外(wài)照射(254nm波長，與工(gōng)作(zuò)台麵近距離(lí))適合於滅活(huó)去汙染(rǎn)。可移(yí)動紫(zǐ)外(wài)綫管燈可用(yòng)來確保(bǎo)工作後對(duì)實(shí)驗台麵的充(chōng)分(fēn)照(zhào)射(shè)。 樣(yàng)本處理(lǐ)對(duì)核(hé)酸(suān)擴增有(yǒu)很大(dà)影響，必須使用(yòng)有效的核酸提取(qǔ)方法，可在(zài)開展臨床標(biāo)本(běn)檢測(cè)前(qián)對提取方法(fǎ)進(jìn)行(háng)評價。 用(yòng)於RNA擴(kuò)增檢測樣(yàng)本製備(bèi)好以(yǐ)後(hòu)，應立即進(jìn)行cDNA合成，因(yīn)為cDNA鏈較(jiào)RNA穩(wěn)定，保存相對(duì)容易。為保證(zhèng)逆轉(zhuǎn)錄(lù)反應的需要(yào)，應在(zài)標(biāo)本製(zhì)備區(qū)設置(zhì)一個以上(shàng)的(dí)溫(wēn)育裝置。 cDNA合成的理(lǐ)想(xiǎng)溫(wēn)度(dù)依所使(shǐ)用的(dí)酶而定(dìng)，傾向(xiàng)於使用一步(bù)法(fǎ)：即(jí)使用在擴增反應緩衝液條件下(xià)具有逆轉錄(lù)活性(xìng)的熱穩定的(dí)DNA聚(jù)合(hé)酶進行(háng)逆轉錄，其較cDNA合成後再開蓋(gài)以(yǐ)調節緩衝(chōng)液(yè)或(huò)加入(rù)聚合酶進行擴(kuò)增(zēng)發生(shēng)汙染的可(kě)能性降低(dī)。 待測RNA的cDNA拷貝(bèi)須保存在(zài)標(biāo)本製備區，不得在(zài)本區(qū)對(duì)樣(yàng)本進行PCR擴(kuò)增。

　　(三)擴增區(qū)

　　下述工作在(zài)本區(qū)內(nèi)進行：DNA或(huò)cDNA擴(kuò)增。此(cǐ)外(wài)，已製備的DNA模(mó)板和合成(chéng)的(dí)cDNA(來自樣本製(zhì)備(bèi)區(qū))的加入和(hé)主(zhǔ)反(fǎn)應(yīng)混合(hé)液(yè)(來自試劑貯存(cún)和製備區(qū))製備(bèi)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)混(hùn)合液等也可(kě)在本(běn)區內進行(háng)。在巢式PCR測(cè)定中，通常(cháng)在第(dì)一(yī)輪擴(kuò)增後必(bì)須打(dǎ)開反應(yīng)管，因(yīn)此(cǐ)巢式擴(kuò)增有(yǒu)較(jiào)高(gāo)的汙染危(wēi)險性(xìng)，第(dì)二次(cì)加樣必(bì)須在本區(qū)內(nèi)進行。 不能從本區再(zài)進入任何(hé)"上遊(yóu)"區(qū)域(yù)，可降(jiàng)低本區的氣(qì)壓以避免氣溶(róng)膠從(cóng)本區漏出。 為(wéi)避(bì)免(miǎn)氣(qì)溶(róng)膠所(suǒ)致的(dí)汙染，應(yīng)盡量(liáng)減少在本(běn)區內的走動。如(rú)有加(jiā)樣則(zé)應(yīng)在超淨台內進行。打(dǎ)開預(yù)處理過(guò)的反應混合液時必須(xū)防止液體濺(jiàn)出，尤(yóu)其(qí)是(shì)在(zài)巢式擴增步驟之(zhī)間。一個簡(jiǎn)單的方法(fǎ)是在打開反應管前快(kuài)速(sù)離(lí)心(xīn)數秒。可使用(yòng)體(tǐ)積較小的(dí)離心(xīn)機(jī)，因其所占實(shí)驗(yàn)台(tái)麵小，易於用一(yī)隻手(shǒu)操作，適合於大多數超淨台。防(fáng)潮屏(píng)障(zhàng)如石(shí)蠟油或(huò)輕(qīng)礦物(wù)油(yóu)也具(jù)有(yǒu)防(fáng)汙(wū)染作用(yòng)，但(dàn)必(bì)須注意(yì)的(dí)是，礦(kuàng)物(wù)油本(běn)身也(yě)可能(néng)成為(wéi)一種持(chí)續性的汙染(rǎn)源(yuán)。用(yòng)過(guò)的加(jiā)樣(yàng)器必須注(zhù)意清(qīng)潔消毒。 完(wán)成(chéng)操作及(jí)每(měi)天工作後都(dū)必(bì)須對實(shí)驗室台麵進(jìn)行清潔和(hé)消毒，紫外照射(shè)方法(fǎ)與(yǔ)前(qián)麵(miàn)區域(yù)相(xiāng)同。如有(yǒu)溶液(yè)濺(jiàn)出(chū)，必須處(chǔ)理並作(zuò)出記(jì)錄(lù)。

　　(四)擴(kuò)增產物分(fēn)析區

　　下(xià)述操作在本區內進(jìn)行(háng)：擴增(zēng)片(piàn)段的(dí)測定。 核酸擴增後產(chǎn)物(wù)的分析(xī)方法多(duō)種多樣(yàng)，如(rú)膜上(shàng)或微孔板上(shàng)探針(zhēn)雜(zá)交(jiāo)方(fāng)法(同位素標(biāo)記(jì)或(huò)非同(tóng)位(wèi)素標記)，瓊脂糖(táng)凝膠電(diàn)泳，聚(jù)丙(bǐng)烯酰(xiān)胺(àn)凝膠電(diàn)泳，Southern轉移(yí)，核酸測序方法等。目(mù)前(qián)國(guó)內的商(shāng)品試(shì)劑(jì)盒絕大部分(fēn)均采用非(fēi)同位素(sù)標(biāo)記的(dí)微孔板(bǎn)上探針(zhēn)雜(zá)交方法(fǎ)，即(jí)PCR-ELISA方(fāng)法(fǎ)，也有(yǒu)膜上探(tàn)針(zhēn)雜(zá)交(jiāo)方法(fǎ)。 本區是(shì)*主要的(dí)擴(kuò)增產(chǎn)物汙染(rǎn)來(lái)源，因(yīn)此(cǐ)必須(xū)注意避(bì)免通(tōng)過本(běn)區的(dí)物品(pǐn)及工作服將擴(kuò)增產物(wù)帶(dài)出。在使用PCR-ELISA方法檢測(cè)擴增產(chǎn)物(wù)時，必(bì)須使用(yòng)洗(xǐ)板(bǎn)機洗板，廢(fèi)液必須(xū)收集(jí)至(zhì)1mol/L HC1中(zhōng)，並且(qiě)不(bù)能在實(shí)驗室內(nèi)傾倒(dǎo)，而應至遠離(lí)PCR實驗(yàn)室的地(dì)方(fāng)棄掉(diào)。用過(guò)的吸(xī)頭也(yě)必(bì)須放至1mol/L HCl中浸(jìn)泡(pào)後再(zài)放(fàng)到(dào)垃(lā)圾袋(dài)中按程序(xù)處理(lǐ)，如焚(fén)燒(shāo)。

　　由(yóu)於(yú)本區有(yǒu)可能(néng)會用(yòng)到某些可(kě)致基因突(tū)變和有毒(dú)物質(zhì)如溴(xiù)化乙錠(dìng)，丙烯酰胺(àn)，甲(jiǎ)醛或(huò)同(tóng)位素等(děng)，故應(yīng)注(zhù)意實(shí)驗人員(yuán)的安全防護。 本區的(dí)清潔(jié)消毒和紫(zǐ)外(wài)照射方(fāng)法(fǎ)同前麵區域。本區如(rú)采(cǎi)用(yòng)負(fù)壓條件或(huò)減(jiǎn)壓情(qíng)況下(xià)(如(rú)安裝排風(fēng)扇)可(kě)減(jiǎn)少(shǎo)擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物從(cóng)本區擴散至(zhì)前(qián)麵區域的可(kě)能(néng)性。

　　了(liǎo)解(jiě)了(liǎo)PCR實(shí)驗(yàn)室(shì)的工藝(yì)標準(zhǔn)後，我(wǒ)們(mén)就能大(dà)致(zhì)確認(rèn)PCR實(shí)驗室(shì)的布局(jú)，所需的設備，整體的(dí)設計裝修，PCR實驗室(shì)的(dí)通(tōng)風係(xì)統(tǒng)，PCR實(shí)驗室(shì)建設注意(yì)事項等。

　　航(háng)天(tiān)科恩18年(nián)的實(shí)驗室建(jiàn)設施工經驗，且(qiě)始(shǐ)終堅持(chí)質(zhì)量為(wéi)天。在(zài)實(shí)驗室建設領域有著非常(cháng)豐(fēng)富的行(háng)業(yè)積(jī)累(léi)，服務客戶近萬(wàn)家(jiā)。自有實(shí)驗室家(jiā)具(jù)生產基地，無論(lùn)是實驗(yàn)室(shì)標準建(jiàn)設(shè)還是實驗室(shì)定(dìng)製建設，能大(dà)大縮(suō)短實(shí)驗(yàn)室(shì)施工裝(zhuāng)修周(zhōu)期(qī)。了(liǎo)解(jiě)更多不同(tóng)類型(xíng)的(dí)實(shí)驗(yàn)室建(jiàn)設(shè)方案，免(miǎn)費(fèi)咨(zī)詢(xún)熱綫-0

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