PCR實驗(yàn)室的裝修(xiū)與設計
一,PCR實(shí)驗室(shì)的(dí)裝(zhuāng)修(xiū)
PCR實(shí)驗室裝修的功能區劃分,建(jiàn)議從3方麵來(lái)考(kǎo)慮,即(jí):普通(tōng)實驗(yàn)區,汙染控(kòng)製區,氣(qì)流組織。
1,普通(tōng)實驗(yàn)區:包括產物分析(xī)區,擴增區(qū),標(biāo)本製(zhì)備區,試(shì)劑準備(bèi)區(qū)這(zhè)4個區域。
2,汙染控(kòng)製區(qū):此區域的(dí)規劃有(yǒu)3套(tào)方案(àn),第(dì)1套為各(gè)功能(néng)間相(xiāng)互(hù)連通,以套間方(fāng)式(shì)進(jìn)入人流/物流(liú);第2套(tào)為設置獨立緩衝(chōng)間,人流/物(wù)流(liú)分道,流(liú)程相(xiāng)鄰間設(shè)置物流傳遞窗;第(dì)3套為設置共(gòng)用緩衝間/緩衝(chōng)走(zǒu)廊。
3,氣流組(zǔ)織(zhī):PCR實驗室裝修(xiū)的(dí)氣(qì)流組織需要(yào)從原始試劑混(hùn)配室(shì),DNA提取(qǔ)室,PCR擴增室(shì),檢(jiǎn)測室,送(sòng)風口這5方(fāng)麵來(lái)考慮。
①原始試劑(jì)混配室:房(fáng)間壓(yā)差為正壓,配備(bèi)有潔(jié)淨工(gōng)作台(tái),以防止其他功(gōng)能間對本(běn)房間(jiān)的(dí)汙(wū)染。
②DNA提取(qǔ)室(shì):房間壓(yā)差(chà)為(wéi)負壓,配備有(yǒu)排(pái)風(fēng)係統,以防(fáng)止提取(qǔ)核酸產生的氣(qì)溶膠對工作(zuò)人員的(dí)傷害及擴散汙染。
③PCR擴(kuò)增(zēng)室:房間壓差為負(fù)壓,與(yǔ)DNA提取室一樣,配備(bèi)有排風係統,以防(fáng)止擴(kuò)增產物(wù)造(zào)成(chéng)的擴散汙染(rǎn)。
④檢測室:房間壓差(chà)為(wéi)負(fù)壓,與(yǔ)DNA提取室,PCR擴(kuò)增室(shì)一樣,配備有排(pái)風(fēng)係統,以(yǐ)防(fáng)止相(xiāng)關(guān)汙染。
⑤送風口(kǒu):采用(yòng)的(dí)是頂送風,側下回/排(pái)風(fēng)方(fāng)式(shì)。
二,PCR實驗(yàn)室(shì)的(dí)設(shè)計
這(zhè)裏(lǐ)重(zhòng)點介紹(shào)PCR走廊(láng),傳(chuán)遞窗這兩方麵(miàn)的設計(jì)。
1,PCR走廊(láng):並不是標配,進深不(bù)夠(gòu)時(shí)不(bù)要做PCR走(zǒu)廊(láng),且(qiě)PCR走廊會增加(jiā)交叉汙(wū)染(rǎn)。
這4個(gè)分(fēn)區(qū)(試(shì)劑(jì)儲存(cún)和準備(bèi)區,標本製備區,核算擴增(zēng)區(qū),產(chǎn)物分析(xī)區(qū))原(yuán)本就(jiù)不需連接在一(yī)起。且在物(wù)理(lǐ)空間(jiān)上(shàng)必須(xū)是(shì)完(wán)全相互(hù)獨立(lì)的,各區域無論在(zài)空間上(shàng)還是在(zài)使用中(zhōng),應當(dāng)始(shǐ)終(zhōng)處於完全的分隔狀態,不能(néng)有空(kōng)氣的直接(jiē)相通(tōng)。
2,傳遞(dì)窗:並非必須(xū)設置(隻(zhī)要不涉(shè)及(jí)潔/汙分流(liú)就不需(xū)要設(shè)置傳遞(dì)窗),但一般(bān)實(shí)驗機(jī)構/實(shí)驗人(rén)員喜歡設置(zhì)。
傳遞窗的(dí)本(běn)質(zhì)——同緩(huǎn)衝間,是物流的緩(huǎn)衝(chōng)間。在PCR實驗(yàn)室設(shè)計(jì)中(zhōng),試劑準備(bèi)和(hé)標本(běn)製備間是(shì)重點保護的區域,此(cǐ)處(chǔ)*好不(bù)要(yào)加傳(chuán)遞窗(chuāng),防止(zhǐ)交(jiāo)叉汙染(rǎn)。實驗中的(dí)汙染(rǎn)風險(xiǎn)主要來自於(yú)核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)時的加樣行為(wéi),但由於(yú)操(cāo)作(zuò)在(zài)生物(wù)安全(quán)櫃(guì)(起超淨台(tái)的(dí)作用,*新做法(fǎ))內進行,且確(què)保空(kōng)氣(qì)不(bù)外溢,因此不(bù)存在(zài)汙染(rǎn)。
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