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細胞(bāo)實驗(yàn)室的區(qū)域(yù)設計

更(gēng)新時間(jiān):2023-01-09

  細(xì)胞實(shí)驗室常規區域設(shè)計(jì)主要有(yǒu) 無菌操(cāo)作(zuò)去(qù),孵(fū)育區,製(zhì)備區,儲藏區,清洗,消毒(dú)滅菌區(qū)等(děng),各(gè)個區域功能不(bù)同 ,分(fēn)布不(bù)同,具(jù)體還(huán)要以整體房間(jiān)布局合理(lǐ)安(ān)排。

  1,無菌操作(zuò)區(qū)

  無菌(jūn)操(cāo)作區是隻限於細(xì)胞培養(yǎng)及(jí)其(qí)他(tā)無(wú)菌(jūn)操(cāo)作的(dí)區(qū)域(yù),能與(yǔ)外界隔離,不(bù)能穿行或(huò)受其他幹擾(rǎo)。在一(yī)般環(huán)境的(dí)空(kōng)氣中,由於存在許多塵埃(āi)和雜菌,較易造成汙染。因此(cǐ)接種(zhǒng)工(gōng)作(zuò)要(yào)在空氣經過(guò)滅(miè)菌的環(huán)境裏進(jìn)行,小規(guī)模的(dí)無菌環境可(kě)利(lì)用(yòng)超淨(jìng)工(gōng)作台創(chuàng)造(zào),大規(guī)模的需建無(wú)菌室(shì)。理想的無菌操作室應劃(huá)為(wéi)三部分。

  a.更衣室-供更換衣服(fú),鞋子(zǐ)及(jí)穿(chuān)戴帽子和口罩。

  b.緩衝(chōng)間(jiān)-位(wèi)於(yú)更衣(yī)間與(yǔ)操作間之間(jiān),用於準備工(gōng)作(zuò),還有(yǒu)防(fáng)止汙染的作(zuò)用,以保證(zhèng)操(cāo)作(zuò)間的(dí)無(wú)菌環境,同時(shí)可(kě)放置恒溫(wēn)培(péi)養箱(xiāng)以(yǐ)及(jí)小型儀器。

  c.無(wú)菌(jūn)操(cāo)作間(jiān)-無菌(jūn)操作(zuò)間則(zé)專(zhuān)用(yòng)於(yú)無菌(jūn)操作,細(xì)胞培養(yǎng),其大(dà)小要適(shì)當(dāng),且其(qí)頂部(bù)不宜(yí)過高(gāo)以(yǐ)保證紫外綫(xiàn)的(dí)滅(miè)菌效果(guǒ);牆壁光(guāng)滑(huá)無死(sǐ)角以便清洗(xǐ)和(hé)消毒(dú),無(wú)菌(jūn)操(cāo)作(zuò)間容積(jī)小(xiǎo)且(qiě)為密(mì)閉式(shì),一(yī)般無(wú)菌(jūn)操作間的(dí)空(kōng)氣消毒用(yòng)紫(zǐ)外(wài)綫燈(dēng),有(yǒu)的實驗(yàn)室使用無(wú)臭氧紫外綫消毒器或電子(zǐ)消毒(dú)滅菌器(qì)

  2,孵育區

  孵(fū)育(yù)區(qū)也稱培(péi)養區(qū),本(běn)區對(duì)無菌(jūn)的(dí)要求(qiú)雖不比無菌區嚴(yán)格,但(dàn)仍需清潔無(wú)塵,因此也(yě)應設(shè)置在幹(gān)擾少而非來(lái)往穿行的(dí)區域(yù)。孵(fū)育可在孵(fū)箱(xiāng)或可控(kòng)製溫(wēn)度(dù)的溫(wēn)室(shì)中(zhōng)進行,後者費(fèi)用高(gāo),一般實(shí)驗室多(duō)采用孵箱進(jìn)行工(gōng)作。

  3,製(zhì)備(bèi)區

  製(zhì)備(bèi)區(qū)主(zhǔ)要進行培養(yǎng)液及有(yǒu)關培養用(yòng)的(dí)液體等的(dí)製備(bèi)。應設有(yǒu)試劑櫃,器(qì)械櫃,實(shí)驗(yàn)台和上水道,電源(yuán)等(děng),配(pèi)備的(dí)主(zhǔ)要(yào)儀器(qì)設備有水純化裝置(zhì),天平(píng),微(wēi)波爐,pH計(jì),抽氣泵,電(diàn)爐,培養(yǎng)分裝器,各種(zhǒng)規(guī)格的培養瓶,培養皿(mǐn),移液管(guǎn),燒(shāo)杯,量筒,容量瓶(píng)等。在有(yǒu)天平,pH計,磁力拌(bàn)器(qì)等設備(bèi)下(xià)完成(chéng)製備以後,應(yīng)在無菌(jūn)操作(zuò)台進行(háng)過(guò)濾(lǜ)除菌(jūn)。液體(tǐ)製備直接關(guān)係(xì)組(zǔ)織(zhī)細胞(bāo)養的成(chéng)敗(bài),因此嚴格無(wú)菌操作。

  4,儲藏區(qū)

  儲藏(cáng)區主要(yào)存放(fàng)各類冰(bīng)箱,幹(gān)燥(zào)箱(xiāng),液氮(dàn)罐,無(wú)菌培養液(yè),培(péi)養瓶等,此環境也(yě)需要(yào)清潔無(wú)塵(chén)。為(wéi)了(liǎo)保存細(xì)胞,特別(bié)是不易獲得的突變型細胞(bāo)或細胞(bāo)株,要將(jiāng)細(xì)胞凍(dòng)存。凍(dòng)存的溫度一(yī)般(bān)為液(yè)氮溫(wēn)度(dù)-196℃。

  細胞的(dí)凍存過程需(xū)要一(yī)係列(liè)程序降溫(wēn),一般(bān)為(wéi)4 ℃下(xià)存放30min。轉(zhuǎn)放-20 ℃ 1 h,再(zài)轉入-80—-70℃過夜(yè),之(zhī)後才可(kě)以轉移到液(yè)氮(dàn)內(-196℃)。因(yīn)此儲存(cún)區配(pèi)備冰箱(xiāng),低(dī)溫(wēn)冰箱,超低溫冰箱和(hé)液氮(dàn)罐等設備。

  5,清(qīng)洗和消(xiāo)毒滅(miè)菌區

  清(qīng)潔(jié)和消毒(dú)滅(miè)菌區應(yīng)與其他區域分開(kāi),主要進行所(suǒ)有細胞培養器皿的清洗,準備(bèi),消毒及三蒸(zhēng)水(shuǐ)製備等(děng)工作(zuò),應(yīng)備(bèi)有(yǒu)高壓(yā)蒸(zhēng)汽滅菌鍋,細(xì)菌(jūn)過(guò)濾(lǜ)設(shè)備(bèi),電熱(rè)幹燥箱,消毒櫃,排風設(shè)備(bèi)等(děng)。



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